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本文标题:"显微镜计数前需要用滤膜将一定体积的细胞浓缩"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2016-10-31 16:41:24

显微镜计数前需要用滤膜将一定体积的细胞浓缩

 
    当需计数的样品几乎不含细胞或者细胞浓度非常低时(如灌装
流水线上的葡萄酒),在显微镜计数前需要用滤膜(<0.45μm)将一
定体积的细胞浓缩。
    1.用9mL稀释空白液和样品充分混匀,准备合适梯度的待测样
品。
    2.将血球计数板上的盖片盖在计数槽上。
    3.如果计数前需要进行细胞染色,必须将样品和染色液混合
均匀。记录体积和特定的稀释参数。
    4.使用移液管将稀释或未稀释的样品滴1滴于血球计数板上每
个待测表面的输液槽(V形凹槽)内,通过毛细管渗透作用,盖片下
的样品溶液将均匀渗透入计数区域中。或者,将最终稀释液直接滴
1滴于计数方格中,之后盖上盖片。尽管这种方法也可行,但盖盖
片时要非常小心,避免在计数区域内出现气泡。另外,溶液未充满
计数方格或者溢出计数槽都是不行的。
    5.使用显微镜时,可以选择40×或100×的物镜放大倍数,统
计足够量的方格中的细胞数,使细胞总数约600个。分别统计血球
计数板上的2个计数区域的细胞数,再相加取平均值。
    6.计算公式:原始样品菌数(细胞个数/mL)=计数区域内的平
均细胞数×用于计数的溶液体积×稀释倍数
 

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