本文标题："显微镜观察酵母形状检片,在测定出芽率的同时测定染色率"
发布者：yiyi ------ 分类: 行业动态 ------
人浏览过-----时间：2015-9-10 16:47:50
显微镜观察酵母形状检片,在测定出芽率的同时测定染色率
染色率的测定
活的细胞因新陈代谢不停地进行，所以细胞内氧化还原
值(rH)颇小，还原力强，对无毒染料能还原脱色；而死细胞
及代谢缓慢的老细胞，无此还原力。次甲基蓝(美蓝)无毒，
能被活细胞还原为无色，故用以区别细胞的死活，以染色率
表示之。
用上述观察酵母形态的检片，在测定出芽率的同时测定
染色率。计算时一般取3～5个视野的平均数。
酒母醪常易为各种细菌所污染。细菌个体小，消光率
小，在显微镜下不易明显观察，且细菌种类繁多，在工厂生
产条件下，检查和鉴别是一件相当复杂和困难的事。在生产
中可采用一般的染色方法粗略地加以检定。
(1)试剂
①齐氏石炭酸复红染色液(试剂120)
②香柏油
③二甲苯
(2)测定步骤
①检片的制备取浸泡于酒精中的干净的载玻片一块，
在酒精灯上烧去残酒(不要用布或纸抹)后，涂试样一小滴
于载玻片中央，在火焰上通过2～3次，使涂片上的菌体贴
牢于载片上，以免染色洗涤时脱落(通过火焰固定涂片时，
要注意掌握通过火焰的速度和温度，过快不易固定，过慢则
因温度过高，细胞易变形。蛋白质在70℃以上就能凝固，
固定于载片上)。
载片固定后，滴数滴齐氏石炭酸复红染色液于涂片上，
稍加热，静置1分钟。染色时间一到，即用自来水冲洗，将
涂片上的染色液洗去(注意!水要冲在涂面旁边，不要对准
涂面冲)，而后用吸水纸吸千，稍停片刻，即可镜检。
②镜检方法将载片置于显微镜下，用油镜观察。先
数酵母总数，再数同一视野内被复红染色之杆菌等的细胞
数，镜检3-5个视野，计算杂菌率。
酵母细胞数的测定
酵母细胞数是成熟酒母醪的一项主要控制指标，是衡量
酒母质量、控制工艺操作的重要根据。因此，必须熟练地掌
握酵母细胞数的测定方法，及时地满足生产的需要。
所用仪器和试剂
血球计测定酵母细胞数通常应用血球计。血球计
为一块具有H形沟槽的厚玻片
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