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本文标题:"荧光显微镜下观察神经原始细胞的特点"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2013-3-29 17:13:10

 荧光显微镜下观察神经原始细胞的特点

 
大鼠神经原始细胞具有增生 (proliferation) 之特性:
 
在相位差显微镜之观察下,培养的神经原始细胞在第二天左右,
开始複制及增生,至第四天左右,这些细胞已经形成一些小球,直到
第七天时,形成明显的神经细胞球 (neurosphere)
 
将培养 7 天后的神经原始细胞,经离心 600×g 5 分钟,将上清液
去除,重新转种 (passage),计数细胞数目,至第四次转种 (即第五代),
神经原始细胞具有複制及自我再生之能力
 
将神经原始细胞球,置于事先以 poly-L-lysine 覆盖之培养皿上,
用 nestin 抗体以免疫细胞染色法 (immunocytochemistry) 鑑识神经原
始细胞,呈棕色的细胞即为神经原始细胞 
 
这些具有染色的神经细胞团表现 nestin 免疫反应性,由显示这些细胞包含神经表皮干
细胞之间质性细丝蛋白质构造,而在分化之神经细胞或胶质细胞则并
不具有此特性。
 
将神经原始细胞球,以绿色萤光蛋白 (GFP) 转殖 (transfection)
入神经细胞球内,以标示细胞并观察型态学,在滤镜 FITC 萤光显微
镜下观察可清楚地看出数十至数百颗细胞本体,以及细胞与细胞间的联繫

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