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本文标题:"测定由氨基酸-离子材料上进行气液层析"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2017-7-9 3:12:14

 比色计测定由氨基酸-离子材料上进行气液层析

 
    蛋白质水解物一类的样品在低pH的情况下通过一个注
射系统被引入,并用泵打到强酸性离子交换树脂上。具有不
同离子强度和不同pH的缓冲液在一个特殊的梯度腔中混合,
使混合后的缓冲液的pH和离子强度逐渐增加,然后用一个泵
将这种缓冲液通过柱进行洗脱。从柱上下来的洗脱液和苟三
酮颜色试剂混合,同时也引人氮气形成一个有规律的气泡,以
防止被洗脱的化合物过分的混合。然后混合物在油浴上加热
显色,通过一个冷却的螺旋管,再通过一个调置在570毫微米
的比色计测定由氨基酸和荀三酮反应所产生的蓝颜色。比色
计和一个双道记录仪相联,记录了从柱上下来的洗脱液的连
续图形。脯氨酸和经基脯氨酸与荀三酮产生黄颜色,因此洗
脱液经过第二个调置在440毫微米的比色计来测定这二种氨
基酸的量,结果被记录在记录仪上。很多系统使用二根柱,第
二根柱是碱性阴离子交换树脂,用于分离碱性氨基酸和氨。
    改良过的纤维素对于大分子(如蛋白质和核蛋白)的离子
交换分离也是特别有用的。这些大分子因为它们不能渗人到
交联的结构中,因此不能在一般的树脂上被分离。但是,纤维
素是纤维状的,功能基团主要都在表面,对于大分子的交换十
分有效。狡甲基纤维素(CM一纤维素,其CH2OH被CH2OCFI2
COO一基团所取代)是一种十分有用的阳离子交换剂,二乙氨
乙基纤维素(DEAE一纤维素)同样也是一种很有用的阴离子
交换剂。最近,已广泛地使用了在离子交换材料上进行的气
液层析。
 

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