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本文标题:"测量酶活性可用中止反应试验-生物实验"

发布者:yiyi ------ 分类: 行业动态 ------ 人浏览过-----时间:2016-8-30 1:1:19

测量酶活性可用中止反应试验-生物实验

 
中止反应法测定酶活性
 
    测量酶活性可用中止反应法(Stoppedmethod)或连续反应法中
止反应法是将酶反应按时即刻完全停止,取出反应物或产物,于以
分离,再确定产物的生成量或反应物的消耗量,算出酶活性。连续
反应法无需取样中止反应,而是在酶反应过程中,用仪器来监测反
应进行的情形,记录结果,算出酶活性。连续法用一个样品可以作
多次测定,使用方便,又极易查出动力学的反应级数。若是零级反
应,产物的量当与酶活性成正比,可以立刻算出结果,但是很多酶
反应却无法使用连续法,而中止反应法虽略感不便,几乎任何酶都
可以用这种方法测量酶活性。
 
   中止反应法  中止反应法是在酶和底物的恒温反应过程中,在
到达各个予定的时间时,取出定量的样品,使酶立刻变性,不再反
应,然后测量反应产物的生成量。由零时开始,产物的生成量至少
在开始阶段的一两分钟内应形成直线形的增加,否则一定是测量错
误,或反应条件不对,才会发生偏差。欲使酶变性,最常用的方法
是加入三氯乙酸或过氯酸使酶蛋白沉淀。
 

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